передовые технологии
диагностики
диагностики
латентного туберкулеза
Принцип работы теста
TB-Feron – это дианостический лабораторный тест in vitro для выявления M. Tuberculosis. В основе теста используется оценка клеточного иммунного ответа у человека методом IRGA (Interferon Gamma Release Assay). Принцип метода IGRA заключается в стимулировании Т-лимфоцитов антигенами Mycobacterium tuberculosis (смесь рекомбинантных белковых антигенов ESAT-6, CFP-10 и TB 7.7), в ответ на это Т-лимфоциты вырабатывают (в случае если Т-лимфоцит ранее встречался с M. Тuberculosis) или не вырабатывают (встречи с M. Тuberculosis ранее не было) интерферон-гамма.
ИФН-γ
Антигенпредставляющая клетка взаимодействует с антигеном
и Т-лимфоцитом
и Т-лимфоцитом
Т-лимфоцит
продуцирует ИФН-γ
продуцирует ИФН-γ
Антигенпредставляющая
клетка
клетка
Т-лимфоцит
Антиген
Уровень полученного интерферона-γ измеряется методом иммуноферментного анализа (ИФА) и далее сравнивается с контрольными значениями.Для постановки теста TB-Feron не требуется специального оборудования. Тест может быть исполнен в любой медицинской лаборатории, имеющей стандартное общелабораторное и ИФА оборудование.
Что происходит в пробирках TB-Feron?
Пробирка TB-Feron Nil Tube показывает фоновые значения интерферона.
Является отрицательным контролем
На стенках пробирки TB-Feron TB Antigen Tube находятся антигены
ТБ (антигены ESAT-6, CFP-10,
TB 7.7). В ответ на эти антигены происходит выработка интерферона
Т-Лимфоцитами
На стенках пробирки TB-Feron Mitogen Tube находится митоген. Данная пробирка является положительным контролем.
Тест проводится в два этапа
1
Забор образца
Сначала осуществляется забор образцов цельной крови в пробирки, входящие в состав изделия, включая пробирку нулевого контроля (TB-Feron Nil Tube), пробирку с антигеном ТБ
(TB-Feron TB Antigen Tube) и пробирку
с митогеном (TB-Feron Mitogen Tube).
Пробирки для забора крови содержат антикоагулянт гепарин натрия.
Забор образца цельной крови можно осуществлять в гепариновую пробирку
(при необходимости транспортировки),
в дальнейшем перенести биоматериал крови
в 3 пробирки TB-Feron.
(TB-Feron TB Antigen Tube) и пробирку
с митогеном (TB-Feron Mitogen Tube).
Пробирки для забора крови содержат антикоагулянт гепарин натрия.
Забор образца цельной крови можно осуществлять в гепариновую пробирку
(при необходимости транспортировки),
в дальнейшем перенести биоматериал крови
в 3 пробирки TB-Feron.
2
Проведение теста
Пробирки необходимо поместить на инкубирование в возможно короткие сроки,
а именно в течение 16 часов с момента забора образцов. По истечении 16–24 часов инкубирования при температуре в 37 °C, пробирки центрифугируют, отбирают плазму
и измеряют концентрацию ИФН-γ (МЕ/мл) методом (ИФА, IGRA).
а именно в течение 16 часов с момента забора образцов. По истечении 16–24 часов инкубирования при температуре в 37 °C, пробирки центрифугируют, отбирают плазму
и измеряют концентрацию ИФН-γ (МЕ/мл) методом (ИФА, IGRA).
Сбор образцов
Инкубация и получение
плазмы
Измерение ИФН-γ
Анализ результата
Нулевой
контроль
контроль
Антиген
Митоген
В состав набора входит
- 1Микропланшет с нанесенными антителами
(Antibody coated microplate) (96 лунок) - 2Стандартные образцы (STANDARDs)
(2 мл) - 3Растворитель
(ELISA Diluent)
(15 мл) - 4Промывочный буферный раствор, концентрат 20х
(Wash buffer (20X concentrated)) (50 мл) - 5Конъюгат фермента (Enzyme conjugate)
(1 мл) - 6Тетраметилбензидиновый (ТМБ) субстрат
(TMB Substrate) (15 мл) - 7Стоп-реагент
(Stop solution)
(15 мл) - 8Клейкая пленка для планшетов
(Adhesive plate sealer) - 9Пробирка для забора крови Mitogen
(TB-Feron Mitogen Tube) (4 мл) - 10Пробирка для забора крови TB antigen
(TB-Feron TB Antigen Tube) (4 мл) - 11Пробирка для забора крови Nil
(TB-Feron Nil Tube)
(4 мл) - 12Инструкция по применению
Основные характеристики теста
Пример постановки с набором TB-Feron
Вопрос-Ответ
Активный ТБ характеризуется неконтролируемым ростом Mycobacterium tuberculosis, который возникает, когда ТБ бактерии способны преодолеть иммунную систему человека. ЛТБИ рассматривается как состояние носительства инфекции M. Тuberculosis, при котором люди бессимптомно переносят ТБ в своем теле. При ЛТБИ инфекция хорошо сдерживается иммунной системой.
Нет. TB-Feron определяет наличие туберкулезной инфекции без разделения на активную или латентную формы.
Нет, сдача образцов крови проводится без каких-либо предварительных процедур.
Процесс смешивания обеспечивает равномерное смешивание крови и антигенов/митогена, что приводит к более качественной секреции интерферона-γ т-лимфоцитами.
Нет, транспортировка пробирок TB-Feron с образцами крови проводится в вертикальном положении.
Транспортировка образцов крови проводится при комнатной температуре 15-25°С
Цвет плазмы даже без видимой примеси эритроцитов может варьироваться от почти бесцветного до оттенков желтого и бледно-коричневого цвета. Указанные характеристики не влияют на результаты TB-Feron.
Пробирки TB-Feron с образцами крови после инкубации до центрифугирования транспортируются при температуре от +2 до +25 °C
Возможно хранение плазмы в пробирках TB-Feron при 2-8°С 1 неделю с момента сбора крови или при -20°С в течение нескольких месяцев.
Рабочий детектирующий раствор хранится при температуре 2-8°С в течение 4 часов.
Промывочный буферный раствор хранится при комнатной температуре в течение 1 недели.
Вскрытие компоненты набора хранятся до окончания сроков годности при соблюдении условий хранения.
Если результаты оптической плотности фонового интерферона (пробирка Nil) >8.0 IU/ml, то результаты считаются неопределенными. Не рекомендуется проводить тестирование TB-Feron в активную фазу инфекционного заболевания, в период выздоровления, а также сразу после прививок (например, корь)
Очень низкие результаты оптической плотности в пробирке с митогеном (пробирка Mitоgen) говорят о неспособности т-лимфоцитов продуцировать интерферон-γ. Это может быть связано с низким качеством образцов крови, неверными условиями транспортировки, техническими ошибками в проведении теста и т.д.
В некоторых случаях значения интерферона-γ для пробирок с TB-antigen у пациента может оказаться выше предела обнаружения ИФА ридера. Данное явление не будет влиять на интерпретацию результатов теста. Значения оптической плотности в пробирке Mitоgen очень часто выше предела обнаружения ИФА ридера, что является нормой.
Контакты
Остались вопросы?
Заполните форму
Заполните форму
Наш сайт использует файлы cookie и похожие технологии для удобства пользователей. Продолжая пользоваться сайтом, Вы подтверждаете свое согласие на использование cookie.